Chỉ hiển thị
0:00
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Dans toutes les cellules vivantes,
0:01
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
il y a un énorme complexe riboducléoprotéique,
0:06
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
présent à milliers d 'exemplaires
0:10
S… Speaker 2 (biotechnologie c2 p2)
par cellules, quelque
0:14
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
chose qui est utilisé dans la traduction.
0:16
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Le ribosome.
0:18
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Le ribosome,
0:20
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
c 'est un assemblage de trois ARN avec 150 protéines,
0:24
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
200 protéines autour.
0:25
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
C 'est un énorme complexe riboducléoprotéique.
0:28
S… Speaker 2 (biotechnologie c2 p2)
Il y en a plein d 'autres.
0:30
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Le spliceosome,
0:32
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
le complexe qui épice,
0:34
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
qui fait l 'épissage des prémessagers,
0:36
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Spice ozone contient des ARN et des protéines.
0:39
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
C 'est très courant dans le monde vivant d 'avoir cette association entre des ARN et
0:43
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
des protéines.
0:43
S… Speaker 2 (biotechnologie c2 p2)
Alors,
0:47
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
comment ça fonctionne tout ça ?
0:51
S… Speaker 2 (biotechnologie c2 p2)
Alors là,
0:52
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
vous avez un locus CRISPR,
0:55
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
typique des CRISPR de type 2A,
0:58
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
on verra après les différents types.
1:00
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
En l 'occurrence,
1:01
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
ça c 'est le locus de stratococcus que j 'ai.
1:03
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Donc le locus qui correspond à la structure de la protéine que je viens juste de vous montrer.
1:09
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Ce domaine,
1:10
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
il se divise en trois parties.
1:12
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Il y a une première partie qu 'on appelle
1:16
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
le transactivating CRISPR arénée,
1:18
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
qui est représenté ici,
1:19
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
qui est un petit gène,
1:21
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
qui est transcrit dans ce sens -là et qui synthétise un
1:26
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
petit R.
1:26
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Première partie du problème.
1:29
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Dans la deuxième région,
1:32
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
il y a une série de phases ouvertes de lecture,
1:35
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
dont les noms sont indiqués ici.
1:37
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
La première,
1:37
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
c 'est Casme.
1:38
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Ici, vous avez le promoteur.
1:40
S… Speaker 3 (biotechnologie c2 p2)
Ça,
1:40
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
c 'est un opéron.
1:41
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
C 'est l 'opéron casse.
1:42
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Vous savez, dans les bactéries,
1:43
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
les jeunes sont souvent en opéron.
1:44
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Il y a un promoteur qui transcrit tout le bazar.
1:47
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Et après,
1:48
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
chaque phase ouverte de lecture est traduite.
1:50
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Et
1:54
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
la troisième partie,
1:55
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
c 'est la partie CRISPR.
1:56
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Ici,
1:57
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
vous avez un promoteur qui transcrit cette région.
1:59
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Cette région,
2:01
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
elle contient deux types d 'éléments.
2:03
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Des petites boîtes noires qui sont toutes identiques
2:08
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
entre elles, en séquence.
2:09
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Toutes les boîtes noires pour la même séquence.
2:12
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Et des petits losanges de couleurs dont la séquence diffère.
2:16
S… Speaker 2 (biotechnologie c2 p2)
Ces
2:20
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
petits losanges correspondent à des bouts de séquence de phages ou de virus
2:24
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
qui, dans un passé plus ou moins lointain,
2:26
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
ont infecté la bactérie.
2:27
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
La bactérie les a détruits,
2:30
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
a récupéré leur bout d 'ADN et l 'a intégrés
2:34
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
dans ce locus crisper.
2:36
S… Speaker 2 (biotechnologie c2 p2)
Ça,
2:37
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
c 'est la mémoire.
2:38
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
de la bactérie.
2:39
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
La bactérie,
2:40
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
ici, 1, 2,
2:41
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
3, 4, 5,
2:41
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
6, elle a été envahie 6 fois par des virus ou des phages,
2:44
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
et donc elle a gardé 6 morceaux d 'ADN en sorte de mémoire dans son
2:48
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
génome.
2:49
S… Speaker 2 (biotechnologie c2 p2)
De
2:53
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
façon assez intéressante,
2:56
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
d 'un point de vue historique,
2:57
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
quand on a séquencé les premières bactéries dans les années 90,
3:00
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
on a trouvé ces espèces de séquences répétées qui étaient présentes dans tous
3:04
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
les génomes bactériques.
3:05
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Personne ne savait à quoi c 'est ça.
3:07
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Donc en fait,
3:08
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
les répétitions CRISPR,
3:09
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
elles sont connues depuis le milieu des années 90.
3:12
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Personne ne savait à quoi ça servait.
3:15
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Et 20 ans plus tard,
3:16
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
on s 'est rendu compte quelles séquences répétées,
3:19
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
elles étaient à côté d 'une phase ouverte de lecture qui pourrait bien être une endonucléase.
3:23
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Donc là,
3:24
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
ils ont fait 1 plus 1 égale 2 et ils ont compris comment ça marche.
3:27
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Mais ça,
3:28
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
ça a été découvert 20 ans,
3:32
S… Speaker 4 (biotechnologie c2 p2)
25 ans avancé.
3:34
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Donc, l 'occus CRISPR,
3:35
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
il est en trois parties.
3:36
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
D 'abord, il y a ce petit ARN transcrit.
3:39
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Après, il y a ce grand opéron qui contient la mycélase.
3:41
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Et ici, la mémoire de la cellule avec les petits morceaux CRISPR.
3:45
S… Speaker 5 (biotechnologie c2 p2)
Alors,
3:46
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
comment ça marche ?
3:47
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Donc ici,
3:50
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
l 'ARN qui est en rouge,
3:52
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
là, c 'est celui qui est transcrit à partir de ce petit gène,
3:54
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
d 'accord ?
3:56
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Le tracker.
3:56
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Et il a une région qui
4:00
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
peut s 'apparier,
4:01
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
qui est homologue,
4:03
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
à cette petite région en noir.
4:07
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Donc ici,
4:07
S… Speaker 4 (biotechnologie c2 p2)
là, ce truc -là,
4:08
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
il est transcrit, ce CRISPR -ARRI,
4:09
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
il est transcrit.
4:10
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Vous voyez ici le transcrit,
4:11
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
d 'accord,
4:12
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
le précurseur.
4:13
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Vous voyez ici,
4:14
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
ces régions -là sont les régions qui correspondent aux petites boîtes noires,
4:17
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
et les régions colorées correspondent aux régions colorées ici.
4:21
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Donc le tracker,
4:23
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
il vient se mettre là,
4:24
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
il reconnaît cette séquence -là,
4:26
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
cette petite boîte noire,
4:27
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
et il y a une RNase 3 qui est soit connée par la cellule,
4:31
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
soit connée ailleurs dans la cellule,
4:32
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
soit elle est connue dans cet opérons,
4:33
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
ça dépend des bactéries,
4:34
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
qui vient couper ici.
4:39
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Donc ça libère ces bouts d 'ADN colorés.
4:42
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Et ces petits bouts d 'ADN colorés,
4:45
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
ils sont après reconnus par la Cas9.
4:48
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Ils viennent se fixer sur la Cas9 et ça,
4:50
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
ça fait l 'ARN guide.
4:51
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Ça,
4:52
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
c 'est ce qu 'on appelle typiquement le guide.
4:54
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Ça fait 20 nucléotides au respect Cas9.
5:00
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
un ARN guide.
5:00
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Elle va chercher dans la cellule s 'il y a de
5:04
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
l 'ADN double brun qui est identique au guide et qui porte une
5:08
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
barbe à proximité.
5:09
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Et elle va se fixer.
5:11
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Le domaine russé va faire une cassure simple brun.
5:14
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Le domaine HNH va faire une cassure simple brun.
5:16
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Et au bout du compte,
5:17
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
vous aurez une cassure double brun.
5:18
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Il faut noter que les deux cassures simple brun
5:22
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
se font simultanément par rapport à ce que j 'ai dit tout à l 'heure pour la néganucléase ou la conformation
5:27
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
de la protéine.
5:28
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
qui fait que la cassure se fait avec quatre nucléotides de distance,
5:32
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
donc c 'est une cassure cohésive.
5:34
S… Speaker 2 (biotechnologie c2 p2)
Ici,
5:35
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
les deux cassures simple -brun se font au même moment,
5:38
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
simultanément,
5:39
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
et donc la cassure est franche.
5:41
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
C 'est important.
5:43
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Les cassures franches et les cassures cohésives sont pas
5:47
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
réparées exactement de la même façon dans la machine.
5:48
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Est -ce que vous avez compris ça ou
5:52
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
est -ce que je réexplique ?
5:57
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Ce n 'est pas trivial.
6:00
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Ce qu 'il faut bien visualiser,
6:03
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
c 'est que ça,
6:04
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
là, c 'est ça.
6:06
S… Speaker 2 (biotechnologie c2 p2)
Ça,
6:08
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
là, c 'est ça.
6:09
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
C 'est la même chose que ça.
6:10
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
C 'est juste grossi.
6:11
S… Speaker 2 (biotechnologie c2 p2)
Là,
6:12
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
la boîte rose,
6:13
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
elle est là.
6:13
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
La boîte mauve,
6:15
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
elle est là.
6:15
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
La boîte verte,
6:16
S… Speaker 5 (biotechnologie c2 p2)
elle est là.
6:16
S… Speaker 5 (biotechnologie c2 p2)
Après,
6:18
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
ils n 'ont pas mis les trois autres boîtes.
6:19
S… Speaker 4 (biotechnologie c2 p2)
Donc ça,
6:21
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
c 'est la mémoire de la cellule.
6:23
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Chaque bout correspond à un bout de phage ou de virus qui a envahi la bactérie
6:27
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
à une époque reculée.
6:28
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Donc on transcrit tout ça,
6:30
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
on a un ARN,
6:31
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
et là on a transcrit le tracker RNA,
6:34
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
qui lui c 'est toujours le même,
6:35
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
c 'est un petit ARN qui est légèrement structuré,
6:37
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
qui a une épingle et une boucle.
6:39
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Et ce tracker se fixe là,
6:42
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
et là vous avez un ARN double brun.
6:44
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
C 'est un ARN double brun.
6:46
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Et cet ARN double brun est reconnu par une RNase bactérienne
6:50
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
qui dit « Oh là,
6:51
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
il y a un ARN double brun,
6:52
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
ce n 'est pas normal, moi je n 'aime pas les ARN double brun,
6:54
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
ça ne doit pas exister.
6:55
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
» Donc elle coupe là,
6:57
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
là, là.
6:59
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
En fait,
7:01
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
elle coupe à chaque fois qu 'il y a une boîte noire.
7:02
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
L 'ARNase 3 va se couper.
7:04
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Et ces petits morceaux,
7:06
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
là, ils font 20 nucléotiques.
7:07
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Ça,
7:09
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
ça fait 20 nucléotiques.
7:12
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Et donc ce bout -là,
7:13
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
sur le dessin d 'ici,
7:15
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
mais ça aurait pu être ce bout -là ou ce bout -là,
7:17
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
peu importe, il est reconnu par Cas9,
7:19
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
qui est codé par cette orfe.
7:22
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Et Cas9,
7:23
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
maintenant, elle a son ARN guide et elle va chercher dans la cellule un
7:27
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
ADN qui va pouvoir s 'y briser avec cette ARN guide.
7:32
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Donc ici, elle trouve un ADN étranger,
7:34
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
là, qui porte une panne,
7:35
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
qui porte une séquence de 20 nucléotides qui est identique à son guide.
7:39
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Elle va s 'y coller et elle va couper l 'ADN.
7:41
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Donc il faut deux choses pour que ça marche.
7:45
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Il faut qu 'il y ait une panne.
7:47
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Il faut qu 'il y ait 20 nucléotides identiques à l 'air et vite.
7:51
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
En fait, vous verrez que ça,
7:53
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
c 'est sur le papier,
7:53
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
mais qu 'en fait,
7:54
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
la biologie,
7:55
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
c 'est plus compliqué que ça et que in vivo,
7:58
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
ça ne marche pas vraiment aussi bien.
8:02
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Voilà.
8:02
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Au cours de la vie de la bactérie,
8:05
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
elle va être envahie par d 'autres virus et d 'autres phages.
8:08
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Certains phages vont tuer la bactérie,
8:10
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
et par d 'autres,
8:12
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
elle va réussir à s 'en débarrasser.
8:13
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Et donc,
8:14
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
chaque fois qu 'elle se débarrasse d 'un nouveau phage,
8:16
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
elle prend un petit bout de 20 nucléotides,
8:18
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
donc il y a tout un système de,
8:20
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
je l 'appelle le système d 'adaptation,
8:22
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
K5, K2,
8:23
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
CSN2,
8:24
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
et il y a d 'autres gènes aussi,
8:25
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
qui vont prendre un bout d 'ADN du phage et le mettre là.
8:29
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
et puis le mettre là,
8:30
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
et puis le mettre là,
8:30
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
et puis le mettre là.
8:31
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Et en fait, en regardant la taille du CRISPR -A -ray,
8:35
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
on sait combien de fois la bactérie a été infectée au cours de sa vie et combien de
8:39
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
fois elle a survécu.
8:39
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Et au fur et à mesure,
8:40
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
elle en rajoute.
8:41
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Elle augmente sa vie dans la consomme.
8:42
S… Speaker 2 (biotechnologie c2 p2)
D 'accord ?
8:44
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Donc vous voyez que c 'est un système de défense.
8:46
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
On avait vu hier le système de
8:50
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
restriction modification avec les enzymes de restriction et les méthylases qui sont associés.
8:54
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Donc l 'ADN méthylé n 'est pas coupé,
8:55
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
l 'ADN non méthylé va être coupé.
8:57
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Donc tout le système est cohérent,
8:58
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
etc.
8:59
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Et ça c 'est un autre système de défense bactérienne qui est complètement indépendant du système
9:03
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
de restriction modification.
9:04
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Alors évidemment,
9:07
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
quand tout ça a été compris,
9:11
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Donc ça c 'est une revue que j 'ai de Jennifer Doudna
9:16
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
et Charpentier qui ont
9:22
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
eu le prix Nobel pour ça.
9:24
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Emmanuel Charpentier a fait
9:28
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
sa thèse à l 'Institut Pasteur et après elle est partie à
9:32
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
l 'étranger, elle travaillait sur quelque chose qui n 'intéressait personne à l 'époque.
9:40
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Elle a travaillé aux Etats -Unis,
9:41
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
elle a travaillé en Allemagne,
9:41
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
et puis finalement,
9:42
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
avec une fardule de moi,
9:45
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
elles ont compris comment tout ça,
9:46
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
ça marchait, elles ont eu pris Nobel.
9:48
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Elles ont eu pris Nobel très rapidement,
9:50
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
je crois, 5 ans après la découverte de tout ce mécanisme
9:55
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
-là, et 5 ans pour un comité Nobel,
9:58
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
c 'est rapide.
9:58
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
En général, on est...
10:00
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
quand on est mobilisés,
10:01
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
on est plus proche de la fin que du début,
10:03
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
on est souvent pas loin de la retraite,
10:06
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
et donc là,
10:07
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
ils ont été mobilisés assez jeunes,
10:08
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
ce qui prouve que cette découverte a été fondamentale.
10:11
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Alors, elle a été fondamentale pour deux raisons.
10:14
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
D 'abord,
10:16
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
parce que c 'était l 'endonucléas qui était la plus facile à manipuler,
10:19
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
parce qu 'il suffisait de dessiner,
10:21
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
il suffit de dessiner un bout d 'ADN de 20 nucléotides,
10:24
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
un oligonucléotide qui est polygonucléotide de PCR.
10:27
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
et vous pouvez théoriquement aller cibler n 'importe quel site temps de chez nous.
10:31
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Une facilité par rapport à ce que je vous ai dit sur le méganucléas,
10:34
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
les thalems, les zingfingers,
10:36
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
ça n 'a rien à voir.
10:36
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Donc facilité d 'utilisation.
10:39
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Et, on s 'est rendu compte plus tard que ce n 'était pas aussi simple que ça,
10:42
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
mais ça c 'est une autre histoire,
10:43
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
et surtout ça a relancé l 'intérêt des boîtes pour la manipulation
10:48
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
des génomes, pour l 'édition du génome et pour la thérapie génique.
10:50
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
La thérapie génique a eu ses heures de gloire à la
10:54
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
fin du siècle dernier,
10:55
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
au début de celui -ci,
10:56
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
et pendant pas mal d 'années est tombée un peu en désuétude parce que ça ne marchait pas très bien.
11:01
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Et là, la découverte du système CRISPR,
11:04
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
on relance l 'idée de faire de la thérapie,
11:06
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
de modifier les génomes et d 'essayer de faire quelque chose avec cet outil
11:10
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
qui, sur le papier au moins,
11:12
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
apparaît super simple d 'utilisation.
11:13
S… Speaker 5 (biotechnologie c2 p2)
Voilà.
11:14
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Donc pour toutes ces raisons,
11:15
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
c 'est un aubel qui est allé très très vite en 5 ans et le long.
11:18
S… Speaker 2 (biotechnologie c2 p2)
Alors,
11:20
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
je vous ai dit que
11:25
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
ce qui se passe naturellement,
11:26
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
c 'est qu 'on a ce trac RNA qui est structuré,
11:28
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
qui vient se fixer à la boîte noire.
11:30
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
avec le guide qui est ici,
11:32
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
qui reconnaît une séquence ADN et qui le coupe.
11:33
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Et ce qu 'on fait,
11:34
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Doudna et Charpentier,
11:36
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
c 'est qu 'elles ont ingénéré ce truc -là en
11:40
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
rajoutant ici une boucle linker pour
11:46
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
faire un seul ARN qui contient à la fois le guide
11:50
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
et la structure du tracker.
11:51
S… Speaker 2 (biotechnologie c2 p2)
Et ça,
11:53
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
vous le mettez sur un plasmique avec un promoteur,
11:57
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
vous clonez...
11:59
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
N 'importe quel morceau de 20 nucléotides,
12:01
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
vous faites transcrire votre ARN et vous pouvez
12:05
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
cibler n 'importe quel site dans le génie.
12:08
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Donc elles ont juste à ingénérer ce truc -là,
12:10
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
vous devez avoir deux ARN différents,
12:12
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
elles l 'ont relié avec une boucle qui permet d 'avoir à transcrire un seul ARN.
12:15
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Alors les utilisations de casques neufs sont multiples,
12:19
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
donc vous pouvez travailler avec la casque neuf sauvage qui va faire une casque sur le bloc.
12:24
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Si vous faites un mutant dans le domaine RUF -C,
12:26
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
parce que le domaine RUF -C et le domaine HNH sont plus stabilisés,
12:29
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
connus, on sait très bien où sont les sites de reconnaissance,
12:32
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
donc on peut faire une mutation ponctuelle dans le domaine RUF -C et on fera une
12:36
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
nicase qui coupe uniquement le brin du bas.
12:38
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Si vous faites une mutation dans le domaine HNH,
12:41
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
vous allez faire une autre nicase qui va couper uniquement dans le brin du haut.
12:45
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Si vous combinez les
12:49
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
deux mutants,
12:51
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Vous avez maintenant une protéine qui ne coupe
12:55
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
plus, mais qui va reconnaître l 'ADN.
12:57
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Donc cette protéine va se fixer sur l 'ADN,
13:01
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
elle sera incapable de le cliver.
13:02
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
C 'est ce qu 'on appelle la dead Cas9.
13:04
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Elle se fixe,
13:07
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
mais elle ne coupe plus, parce que ces deux domaines catalytiques sont mutés.
13:11
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Mais vous pouvez attacher à cette dead Cas9...
13:14
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
N 'importe quoi.
13:15
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Un domaine activateur de la transcription,
13:16
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
répression de la transcription,
13:18
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
un domaine de méthylase,
13:19
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
tout ce que vous voulez.
13:21
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Et donc cette protéine,
13:23
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
elle va aller reconnaître son site de fixation et le domaine
13:27
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
qui est là va faire méthiner l 'ADN par exemple,
13:30
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
ou déméthiner l 'ADN,
13:31
S… Speaker 3 (biotechnologie c2 p2)
tout ce que vous voulez.
13:31
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Donc ça c 'est extrêmement flexible comme système.
13:35
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Et ça aussi c 'est une des raisons pour lesquelles il y a eu un grand engouement pour cette famille
13:39
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
CRISPR, c 'est qu 'on peut l 'utiliser dans des tas de contextes différents.
13:44
S… Speaker 6 (biotechnologie c2 p2)
Alors ici,
13:45
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
voilà un autre exemple.
13:46
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
On peut faire des doubles unicases.
13:49
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Vous prenez une casse avec un ARN guide,
13:52
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
une casse avec un autre ARN guide,
13:54
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
qui est 50 nucléotides plus loin sur l 'ADN.
13:57
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Vous allez faire deux cassures simplement,
13:59
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
par exemple.
14:00
S… Speaker 2 (biotechnologie c2 p2)
Voilà,
14:01
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
donc le nombre de possibilités est aussi important que
14:06
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
l 'imagination des chercheurs.
14:07
S… Speaker 2 (biotechnologie c2 p2)
Alors
14:12
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
juste pour illustrer ce que je viens de dire,
14:15
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Vous voyez ce que je viens de dire ?
14:16
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
J 'ai dit que le prix Nobel avait été attribué au bout de 5 ans.
14:19
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Et très rapidement,
14:21
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
les cas sont rentrés dans la
14:26
S… Speaker 2 (biotechnologie c2 p2)
société civile.
14:27
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
En général,
14:28
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
la manière dont se fait le transfert de connaissances,
14:31
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
ça part d 'un laboratoire de recherche.
14:34
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Ça infuse dans les congrès internationaux.
14:36
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Les congrès internationaux,
14:38
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
ça va rentrer dans les livres universitaires.
14:40
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Et des livres universitaires,
14:42
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
ça va finir dans les livres pour les écoliers,
14:44
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
aux collèges et aux lycées.
14:45
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Et de là, dans les familles.
14:46
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
C 'est comme ça que la science se diffuse généralement.
14:48
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Entre la découverte universitaire et le grand
14:52
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
public, il se déroule parfois à 10 ans,
14:54
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
parfois à 15 ans.
14:55
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Il faut que ça infuse dans la société.
14:57
S… Speaker 2 (biotechnologie c2 p2)
Là,
14:58
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
c 'est aller extrêmement rapidement.
15:00
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Ça allait tellement rapidement que quelques années à peine après la découverte
15:04
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
de CRISPR,
15:04
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
on trouvait déjà des séries télé qui en parlaient.
15:08
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
J 'ai mis un exemple là,
15:10
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
mais il y en a d 'autres, si vous voulez un peu,
15:11
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
vous verrez.
15:11
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Donc ça,
15:12
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
c 'est pour ceux qui tiennent bien les X -Files.
15:14
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
La saison 10 des X -Files,
15:16
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
il y a Scully qui dit « A process called CRISPR -Cas,
15:20
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
CRISPR -Cas9,
15:21
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
RNA and protein cutting genes at exact locations ».
15:25
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Ça, c 'est trois jours après la découverte du système CRISPR.
15:28
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
On parlait déjà de ça dans une série américaine.
15:31
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Autre exemple.
15:34
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Français,
15:36
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
cette fois -ci.
15:36
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Au journal télévisé de France 2,
15:40
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
David Pujadas parlait en quoi ?
15:43
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
En 2016.
15:44
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
C 'est ça,
15:46
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
2016 ?
15:46
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
2016, de CRISPR -Cas9.
15:48
S… Speaker 4 (biotechnologie c2 p2)
Alors,
15:49
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
si vous tombez sur cette vidéo sur Internet,
15:51
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
je vous conseille de l 'écouter parce que la manière dont il prononce CRISPR -Cas9
15:55
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
est assez drôle.
15:56
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Donc voilà,
15:57
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
là on a un exemple de série américaine,
15:59
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
un exemple de grand journal télévisé qui parle de
16:03
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
ça 2 -3 ans après la découverte.
16:06
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
C 'est extrêmement rapide.
16:07
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Donc le système CRISPR a infusé
16:11
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
et passé des laboratoires académiques dans la société civile en entendant plus
16:15
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
rapidement qu 'aucune autre découverte scientifique récente.
16:19
S… Speaker 4 (biotechnologie c2 p2)
Voilà.
16:20
S… Speaker 2 (biotechnologie c2 p2)
Alors,
16:25
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
je vous ai dit...
16:30
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Je vous ai dit qu 'il y avait plusieurs,
16:31
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
que la famille CRISPR était une grande famille,
16:35
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
et donc on a plusieurs représentants.
16:38
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Donc ici au départ,
16:41
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
on a Staphylococcus pyogène,
16:43
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
SP -Cas9,
16:43
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
avec son domaine structurel,
16:48
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
ses deux domaines catalytiques,
16:49
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
sa pâme,
16:50
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
et ses trois acides alignés qui reconnaissent là -bas.
16:52
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Dans la même famille,
16:54
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
on a une autre Cas9 qui vient de Staphylococcus aureus,
16:58
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
donc on l 'appelle SA -Cas9,
17:00
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
celle -là.
17:02
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Vous voyez que,
17:03
S… Speaker 3 (biotechnologie c2 p2)
structurellement parlant,
17:04
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
elle ressemble beaucoup à SPCAS9.
17:07
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Le domaine structurel est plus court,
17:10
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
avec des espèces de trous.
17:12
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Elle a les mêmes domaines catalytiques,
17:15
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
HNH qui est robusté.
17:17
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
La pâme est beaucoup plus longue,
17:20
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
parce qu 'elle fait 5 nucléotides au lieu de 3,
17:22
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
et la pâme est reconnue par ces deux asparagines et ces deux argines.
17:27
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Donc il y a des petites différences dans la reconnaissance et dans la
17:31
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
structure de la protéine,
17:32
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
mais vous voyez que ces deux protéines,
17:34
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
SP -Cas9 et SA -Cas9,
17:36
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
font partie de la même famille.
17:39
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Alors ce n 'est pas forcément le cas de toutes les cases.
17:42
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Ici vous avez un autre exemple,
17:46
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
elle s 'appelle Cas12A,
17:48
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
on l 'appelle aussi parfois CPF1,
17:49
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
alors souvent les...
17:51
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Les cases ont souvent deux noms parce qu 'elles ont été découvertes par deux laboratoires indépendamment
17:55
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
qui les ont nommés indépendamment d 'un autre.
17:58
S… Speaker 3 (biotechnologie c2 p2)
Donc CPF1,
17:59
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Cas12a, c 'est pareil.
18:00
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Elle vient d 'une autre bactérie qui s 'appelle Acidaminococcus.
18:03
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Et la structure,
18:06
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
vous voyez tout de suite que la structure est très différente.
18:09
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Le domaine de reconnaissance,
18:10
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
il n 'a rien à voir.
18:10
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Il y a un seul domaine catalytique qui est le domaine
18:15
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
HNH.
18:15
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
La pâle.
18:18
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
est différente aussi.
18:19
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Et là, ça ne se voit pas sur cette image parce que le guide est derrière,
18:21
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
mais le guide est beaucoup plus gros que le guide d'SP ou d'SA classe 9.
18:25
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Et ici,
18:26
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
au domaine catalytique,
18:27
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
il y a un seul domaine catalytique.
18:28
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Donc,
18:29
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
comme pour les méganucléases,
18:31
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
la classe 12A,
18:34
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
elle fait une cassure simple brun.
18:35
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Après, il y a un changement conformationnel et elle fait une première
18:40
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
cassure simple brun et une deuxième cassure simple brun.
18:42
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
Et ce qui fait que la cassure,
18:44
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
comme dans le cas des méganucléases,
18:45
S… Speaker 1 (biotechnologie c2 p2)
elle est décalée de quelques nucléotides.

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