5965195080011619698
Oct 22, 2026 09:01
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· Whisper Turbo
· 1 ធុងបាស
អត្ថបទនេះផុតកំណត់ក្នុង 12 ថ្ងៃ & # 160; ។
ធ្វើឲ្យប្រសើរសម្រាប់ការផ្ទុកជានិច្ច →
បង្ហាញតែ
5:00
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
ci soffermeremo sugli approcci
5:04
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
che vengono utilizzati per le malattie
5:11
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
genetiche non considerando i
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S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
tumori,
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S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
perché la chiamata delle variate dei tumori è molto più complessa
5:21
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Speaker 1 (5965195080011619698)
e quindi a meno per quest 'anno lasciamo la parte.
5:25
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Allora,
5:26
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
l 'esempio che utilizzeremo come idea di base
5:30
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
per la chiamata di varianti nel contesto di malattie
5:35
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
genetiche causate da una...
5:38
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
da una variazione su un singolo gene o
5:42
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
su un numero abbastanza limitato di geni e basata sull 'uso
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S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
del concetto di trio,
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S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
che probabilmente avete già visto in altri recorsi.
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S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
L 'ideale del trio è fondamentalmente padre e madre che non hanno
5:56
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
la malattia e il figlio che hanno la malattia.
5:58
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Il punto chiave è identificare che tipologia di
6:02
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
mutazione ha dato origine questo tipo
6:06
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
di malattia.
6:07
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Le condizioni che possiamo avere,
6:09
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
come vedete,
6:10
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
sono fondamentalmente tre.
6:12
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
O è un adenovo,
6:13
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
quindi una mutazione che comparsa per la prima volta nel
6:17
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
figlio,
6:19
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
oppure siete in una situazione di malattia
6:24
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
autosomica recessiva perché siete in heterosigosi ed è soltanto
6:28
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
l 'homoticosi recessiva che permette di avere il fenotipo,
6:32
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
quindi i due genitori sono in heterosigosi e non hanno il fenotipo.
6:36
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
si osserva.
6:38
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
L 'altra cosa è invece anche una malattia
6:42
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
che sia collegata al cronosoma X.
6:45
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Allora,
6:47
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
per parlare di questo tipo di
6:51
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
approcci dobbiamo fondamentalmente,
6:54
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
diciamo non rintrodurre perché dovreste aver sentito parlare durante
7:00
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
la triennale,
7:01
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
ma dovremmo almeno
7:04
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
rivisitare il concetto di tecnologie di sequenziamento di seconda
7:08
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
generazione che sono ormai da,
7:10
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
siamo quasi a 30 anni,
7:14
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
sono uno standard consolidato.
7:17
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Le tecnologie di seconda generazione sono quelle che si basano
7:21
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
sul concetto dell 'applicazione economica.
7:23
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Quindi quello che è il passaggio dal metodo di Sanger che
7:27
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
non era utilizzabile in un contesto
7:32
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
veramente massivo per il fatto che erano reagenti troppo costosi
7:36
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
e il throughput,
7:37
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
quindi la quantità di sequenze che potevano essere fatte in
7:42
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
contemporanea,
7:43
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
è troppo basso.
7:43
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Considerate che per i sequenziatori Sanger ce ne siano mai pochissimi
7:47
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
in circolazione,
7:48
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
un sequenziatore Sanger aveva 96 capilari.
7:52
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Una corsa da 800 minuti era più o meno 4 ore
7:56
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
e quindi doveva continuare a vitalicare.
7:59
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
L 'approccio della seconda generazione ha cambiato questa visione perché ha
8:04
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
permesso di passare a un sequenziamento di sequenze più corte,
8:08
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
infatti il gergo del sequenziamento
8:12
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
di seconda generazione,
8:13
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
il nome in gergo è short read,
8:15
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
quindi sequenze relativamente corte.
8:18
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Si chiamava short read perché quando sono nate erano proprio
8:23
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
corte, 25 -30 minuti.
8:25
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Adesso siamo arrivati a un compromesso che è
8:29
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
limitato fondamentalmente dalla tecnologia
8:33
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
che viene utilizzata.
8:34
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
La limitazione odierna sono all 'incirca 150
8:39
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
minuti.
8:39
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Quindi,
8:40
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
quello che voi potete fare è sequenziare lo stesso pezzo di DNA
8:44
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
dai vari lati 150 minuti.
8:48
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
E il motivo,
8:49
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
lo vedremo tra un attimo,
8:51
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
perché è collegato proprio al modo con cui i cluster
8:55
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
che devono essere utilizzati vengono generati.
9:01
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Quindi, se considerate,
9:03
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
questo è l 'articolo da cui è venuta fuori nata
9:08
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
la tecnologia delle short reads e i leader,
9:13
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
diciamo,
9:14
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
quasi incontrastati di questa tecnologia è Illumina
9:19
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
e la piattaforma probabilmente usata nel 95
9:24
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
% o forse addirittura di più di tutti i sequenziamenti del mondo.
9:29
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
L 'idea di base è relativamente semplice.
9:33
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Il problema
9:46
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
di base è che il DNA nel sequenziamento
9:50
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
di seconda generazione non può essere sequenziato in modo diretto
10:00
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Quindi c 'è bisogno di un passaggio che è quello che viene chiamato amplificazione clonale.
10:05
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
L 'amplificazione clonale,
10:07
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
nel caso del sequenziamento di lumina,
10:09
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
si basa sulla possibilità di costruire
10:13
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
questi raggruppamenti di sequenze che originano
10:18
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
da un solo perso di energia.
10:21
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Nelle versioni iniziali della tecnologia questo tipo di approccio
10:25
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
era collegato al fatto che voi avevate fondamentalmente
10:29
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
due diversi tipi di oli colucutivi
10:33
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
attaccati su una superficie di vetro e distribuiti
10:38
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
in modo completamente casuale.
10:42
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Fondamentalmente la quantità di sequenze
10:47
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
di cluster che potevano essere generati dipendeva da quanto materiale veniva
10:51
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
caricato su questi vetri.
10:55
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Con una criticità,
10:57
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
se voi caricavate troppo materiale rischiavate che
11:01
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
i vari cluster iniziassero a essere parzialmente sovrapposti e
11:05
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
di conseguenza puntavate via completamente il sequenziamento.
11:11
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Diciamo che ci sono stati dei passaggi tecnologici che hanno migliorato
11:16
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
questo tipo di approccio con la posizionamento casuale degli
11:21
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
uomini.
11:21
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Quello che si usa adesso si usano quelle che vengono chiamate brussella
11:27
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
pattern.
11:28
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Il pattern è dato da nanoponzetti perfettamente
11:32
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
ordinati e il numero di questi nanoponzetti è fisso.
11:36
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
All 'interno di questi nanoponzetti esistono queste
11:40
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
coppie di oligo che sono posizionate.
11:42
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Quindi il concetto di base è che all 'interno di un altro prozzetto
11:46
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
entra una sua polizuola di DNA,
11:48
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
c 'è una procedura di liquidazione così veloce
11:52
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
che tecnicamente è estremamente
11:57
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
raro l 'ingresso di due sequenze di DNA.
11:59
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
E voi avete miliardi di questi prozetti a
12:03
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
parte su queste prozette.
12:08
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
L 'evoluzione in questo tipo di ambito è stata prevalentemente collegata
12:13
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
al fatto che il numero di microbozzetti
12:17
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
è progressivamente aumentato e questo di conseguenza ha aumentato
12:22
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
le possibilità di generare sequenze e ha abbassato il costo
12:26
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
medio di conseguenza.
12:27
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Se considerate il sequenziamento del genoma umano come medio
12:31
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
di Sanger è venuto a costare
12:36
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
qualcosa di 200 milioni di dollari a quel tempo.
12:39
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Oggi,
12:40
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
se volete sequenziare il vostro DNA,
12:43
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
lo potete mandare sui vari siti che fanno sequenziamento e
12:47
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
avete un sequenziamento 30x per almeno di 800 euro.
12:50
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Poi parleremo del concetto di 30x per così.
12:53
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Allora,
12:55
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
fondamentalmente quello che vedete qua è la situazione in cui
12:59
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
il singolo prezzo DNA è entrato all
13:03
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
'interno di uno di questi
13:08
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
nanopossetti.
13:09
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
E se vedete,
13:11
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
questo pezzo di DNA in realtà è la prima
13:15
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
parte della formazione dell 'applicazione
13:20
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
climata, perché se vedete è legato covalentemente alla
13:24
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
superficie solida.
13:27
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Questo perché il complementare si è attaccato all 'oligo verde
13:31
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
e poi è stata fatta una collegializzazione in modo da partire all 'oligo verde
13:35
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
e avere la prima coppia del vostro pezzo di DNA.
13:38
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Poi denaturate e questa cosa si sta.
13:41
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Allora,
13:42
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
una cosa importante negli approcci di applicazione clonale sviluppati
13:46
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
da Illumina è che voi non usate la temperatura per le fasi
13:51
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
di annealing e denaturazione.
13:54
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Questo che vuol dire?
13:55
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Vuol dire che usate condizioni di solvente che
13:59
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
favorescono la rottura dei legami idrogeno del DNA,
14:03
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
quindi separano le eliche,
14:04
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
o favorescono la loro ventilazione.
14:07
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Quindi c 'è un costante flusso di cambiamento di sorventi che
14:11
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
determina questo tipo di eventi.
14:13
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Nella fase cronale che cosa dobbiamo fare?
14:16
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Abbiamo bisogno di aumentare il numero di copie di questo singolo
14:20
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
elemento.
14:21
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
E questo può essere fatto,
14:23
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
se voi considerate il fatto che se avete una sola molecola,
14:27
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
la molecola DNA è molto flessibile,
14:30
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
quindi...
14:31
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
se avrà tutta la possibilità di muoversi all 'interno del pozzetto
14:35
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
e d 'identificare con l 'altro oligo la sua sequenza
14:39
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
complementare.
14:40
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Quindi forma quello che viene semplicemente un ponte.
14:44
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
A questo punto,
14:46
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
dopo questa condizione di primo ciclo di alibi,
14:50
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
voi cambiate un po' solamente,
14:52
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
inserite una polimerasi e sintetizzate il
14:57
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
filamento complementare.
15:00
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
punto che cosa succede?
15:01
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Cambiate di consulmento in modo che favorisca la denaturazione
15:05
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
che avete due pochi.
15:06
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
E di qua la cosa diventa esponenziale.
15:09
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Non dovete far altro che ripetere questo ciclo,
15:13
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
un numero fisso di volte in generale sono 35 cicli,
15:17
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
per avere abbastanza sequenze.
15:24
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
abbastanza sequenze per costruire questi elementi che sono i cluster.
15:28
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Quello che vedete qua è una figura un po' vecchia per cui questi cluster
15:32
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
sono collegati alle cellule,
15:35
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
scusate,
15:36
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
ai metrosselli non ancora abbattano,
15:38
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
per cui erano cluster disponibili.
15:41
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Però il concetto è ovviamente lo stesso,
15:43
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
ognuno di queste zone che vedete indicate con un
15:47
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
colore più chiaro formamentalmente indicazioni dove c 'è abbastanza DNA
15:51
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
per poter identificare la reazione.
15:54
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Allora,
15:55
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
se voi guardate questo sistema qua,
15:58
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
questo ciclo,
15:59
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
siamo così come nelle
16:03
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
condizioni di poter sequenziare la
16:07
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
nostra molecola di DNA che era questa?
16:14
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
C 'è un problema in questo approccio al momento.
16:17
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Riusciamo ad adjudicare,
16:18
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
ma c 'è un problema che dovreste riuscire a valutare.
16:22
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Perché se
16:26
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
io mi fermassi qua,
16:27
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
non potrei ottenere una sequenza chiara del mio pezzo di DNA.
16:31
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Quanti tipi di
16:35
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
molecole avete qua,
16:37
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
alla fine dei 35 cicli?
16:40
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Tipi,
16:41
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
un tipo o due tipi?
16:43
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
La reazione?
16:51
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Quindi quello che succede è che nel momento in cui vado a sequenziare,
16:54
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
la sequenza diventa forward e traverso.
16:57
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Quindi deve esserci un sistema per risolvere questo.
17:01
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Quello che è stato fatto è che quello che vedete qua è indicato come di oro,
17:05
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
è fondamentalmente una molecola che ha un legame
17:10
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
di solturo.
17:10
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Quindi che cosa succede?
17:12
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Alla fine del processo di amplificazione dei 35 cicli,
17:16
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
quello che viene matto viene passato il solvente fortemente riducente
17:20
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
e quello che succede è che il diodo viene ridotto
17:25
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
e la molecola,
17:27
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
una delle due molecole,
17:28
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
viene mandata lì.
17:30
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Quindi di conseguenza vi ritroverete soltanto un tipo di molecole
17:35
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
all 'interno del sistema.
17:39
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Immaginatevi quindi che siete in questa situazione qua,
17:42
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
però il tipo di molecole è soltanto che considerate un forward da semplicità.
17:46
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Che cosa succede?
17:48
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Quello che abbiamo detto anche in precedenza
17:54
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
è che il sequenziamento...
17:57
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
non lo facciamo,
17:58
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
specialmente sul DNA,
17:59
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
dove siamo interessati ad avere copertura,
18:01
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
quindi vogliamo leggere le più sequenze possibili.
18:04
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Ogni singolo frammento non lo leggiamo solo da una parte,
18:07
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
perché i frammenti sono lunghi su più o meno 500 minuti,
18:10
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
quindi dobbiamo leggere anche dall 'altra per avere incremento
18:14
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
di copertura.
18:15
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Perché nel sequenzamento del DNA quello che è importante
18:19
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
non è riconoscere il singolo elemento,
18:23
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
come nella trascrizione dove volete riconoscere.
18:26
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
il trascritto,
18:28
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
il gene,
18:29
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
volete riconoscere un elemento quantitativo e di conseguenza basta
18:33
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
quantificare quante volte un pezzo che appartiene a quel gene
18:38
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
viene trovato.
18:38
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Qui volete sequenziare la maggior parte del genoma o delle zone
18:43
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
che vi sono a disposizione.
18:44
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Quindi, dato che io sto chiamando varianti,
18:46
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
è senso far sequenziare un pezzo di DNA solo da un lato e lasciare l 'altro pezzo
18:51
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
completamente sconosciuto.
18:52
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Sequenzia anche da un 'altra parte.
18:54
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
La domanda è,
18:55
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
però, una volta che ho costruito il mio cluster,
18:58
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
come faccio a pensare che ho
19:02
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
sequenziato l 'elica forma?
19:04
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Come posso andare dall 'altra parte e sequenziare l 'elica reversa?
19:08
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Si basa sullo stesso concetto dell 'uso del diodo.
19:12
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Quello che succede,
19:13
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
dato che voi vi ritroverete tanti filamenti singoli,
19:17
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
tutti con lo stesso orientamento,
19:19
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
ma il complementare...
19:22
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
continua a essere presente.
19:24
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Non quello del biolo,
19:26
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
ma fondamentalmente immaginatevi la situazione in cui il
19:30
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
verde continua a essere presente.
19:31
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
No,
19:33
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
li abbiamo attaccati così e quindi il biolo è stato tagliato.
19:37
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Quello che poi vi ritrovate,
19:38
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
vi ritrovate un pezzetto di DNA che può essere ancora utilizzato per
19:43
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
ibridare la parte libera del vostro pezzo
19:47
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
di DNA.
19:47
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Quindi che cosa fate?
19:48
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Prendete tutto il cluster,
19:50
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
gli fate fare tanti glitch con l
19:55
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
'elica complementare e costruite di nuovo la condizione che avete
19:59
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
qui.
20:00
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
però non volete fare i principi,
20:02
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
ne fate solo uno,
20:03
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
perché io ho il mio cluster,
20:06
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
non faccio niente altro che di nuovo rimettarmi nella condizione che ho in questo
20:10
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
punto. Ci siete con l 'idea?
20:12
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Faccio l 'idea.
20:13
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Allora,
20:20
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
il mio problema qual è?
20:21
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Io ho questo pezzo di DNA e io
20:26
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
lo voglio sequenziare sia da questa parte che da questa parte qua.
20:29
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Allora,
20:30
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
quando costruisco il cluster,
20:32
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
immaginiamo di avere i triangoli e i quadrati,
20:39
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Io in questo momento ho tagliato qui dove c 'era
20:43
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
il diolo sui quadrati e ho fondamentalmente un pezzo di DNA
20:48
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
che ha questo orientamento qua.
20:51
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Ok?
20:52
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Lo faccio solo con due perché è solo più facile.
20:55
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Ci siete come idea?
20:56
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Qua c 'era l 'altro complementare,
20:58
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
ho usato il diolo e l 'ho tagliato,
20:59
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
però l 'oligo è ancora qua.
21:00
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Io ho tagliato soltanto il pezzettino che mi staccasse il
21:04
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
complementare.
21:05
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Ci siamo come idea?
21:08
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Adesso che cosa faccio?
21:10
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Dato che però questo è complementare a questo,
21:12
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
io posso creare il mio ponte.
21:16
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
E quindi mi ritroverò
21:20
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
nella situazione di avere di nuovo esattamente la
21:25
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
stessa situazione che vedete lì,
21:26
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
dove ci siamo
21:36
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
come idea.
21:36
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
A questo punto li posso raddrizzare e mi ritrovo di nuovo
21:40
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
nella mia situazione di partenza,
21:42
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
dove avrò
21:46
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
qui quello con il quadrato.
21:49
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Qui il triangolino,
21:51
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
qui il quadrato e qui
21:55
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
il triangolo.
21:55
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Allora,
21:57
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
questi qua avevano il diolo prima e sono finiti.
22:00
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Ormai sono fissi,
22:02
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
non li posso più buttare via.
22:03
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Qui c 'è un altro reagente che ha un 'altra chimica,
22:07
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
che non è una chimica basata sulla riduzione.
22:10
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Facendo un trattamento di taglio di questo
22:15
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
residuo modificato,
22:16
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
io quello che posso eliminare sono queste parti.
22:20
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
E così mi trovo,
22:22
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
il cluster è già dato dalle centinaia di migliaia
22:26
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
di sequenze che ho generato con i 35 cicli di amplificazione,
22:30
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
ma l 'ho semplicemente rigirato al contrario e quindi lo potrò sequenziare
22:34
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
dalla parte forza.
22:36
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Perché se avevo il quadrato
22:40
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
sequenziavo dal quadrato e adesso avendo un rigirato sequenzio
22:44
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
dal triangolo.
22:45
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Ci siete come idea?
22:46
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Quindi, fondamentalmente,
22:48
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
una volta che avete fatto il vostro cluster,
22:50
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
siete nelle condizioni da poter,
22:52
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
senza nessun problema,
22:53
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
sequenziare o un lato o un lato.
22:55
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Quindi,
22:56
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
il vantaggio dell 'amplificazione clonale viene fatto una volta,
23:00
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
una volta che avete il cluster lo potete reggirare.
23:02
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Ora,
23:07
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
questo è un video che vi fa vedere come funziona il sistema.
23:10
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
È già basato sulle cellule a pattern,
23:13
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
sulle flossella pattern.
23:15
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Quindi, quello che vedete qua sono i vari consetti.
23:19
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
e quello che vedete all 'interno dei pozzetti qua abbiamo
23:23
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
oligo che sono diciamo blu e porcola
23:29
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
e entra la singola
23:35
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
molecole delica.
23:36
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Se vedete l 'elica è entrata,
23:39
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
questo è un pochino veloce per farvi il taglio e adesso
23:55
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
parte la polimeritazione e faccio la mia cosa.
24:05
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
momento che cosa succede?
24:06
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Cambio,
24:07
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
questo qua è stato un cambio di risolvente che sta rimuovendo
24:11
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
la liquidazione e cominciano a
24:15
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
crearsi molti.
24:17
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Allora
24:24
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
se vedete per il momento abbiamo ancora le due tipologie
24:28
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
di molecole,
24:29
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
quelle basate sul primer 2
24:34
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
e sul primer popola.
24:36
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Quando abbiamo raggiunto il numero massimo di
24:40
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
cicli
24:43
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Vedete che uno viene tagliato ma l 'oligo rimane.
24:46
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Quindi ogni oligo,
24:47
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
per fare l 'utilizzazione con quello che si trova dall 'altra parte,
24:50
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
mi servirà dopo che ho sequenziato un lato
24:54
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
dei miei 150 ducatili,
24:56
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
poi potrò cominciare a sequenziare.
25:00
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Allora, la domanda è,
25:01
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
perché 150 ributini?
25:03
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Per quanto i sistemi enzimatici
25:08
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
siano estremamente efficienti,
25:09
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
non hanno mai un 'efficienza del 100 % sempre.
25:12
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Per cui, man mano scantata avanti nella reazione,
25:15
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
rischiate di fare degli attori.
25:18
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
e 150 rubri di tivi rappresentano il compromesso per
25:22
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
avere una sequenza di alta qualità quindi che nelle parti iniziali
25:26
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
e nelle parti finali contenga un numero omogeneo
25:30
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
potenziale di errori che possono avvenire ma che non aumentano
25:35
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
mano a mano che la sequenza si alloggia.
25:37
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Il motivo per cui non si sequenza oggi 150 rubri di tivi è
25:41
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
perché si potrebbe fare.
25:43
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Però in contesti di questo genere verrebbero inserite mutazioni che
25:47
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
alla fine non ci farebbero usare la quantità di informazioni che
25:51
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
abbiamo acquisito in più,
25:52
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
per cui sarebbero utili.
25:53
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Ok,
25:56
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
adesso una volta che abbiamo preparato il nostro blocco clonale,
26:00
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
quindi quello che deve essere applicato,
26:02
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
c 'è anche un altro punto da considerare.
26:05
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
C 'è un limite nella dimensione dei frammenti che possiamo
26:09
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
sequenziare,
26:10
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
anche utilizzando le cellular pattern.
26:14
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Il limite è 500 .3.
26:16
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Qual è il motivo?
26:18
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Uno perché 500 .3 in ogni caso riescono
26:22
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
a fare dei ponti all 'interno del singolo
26:26
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
pattern, quindi questo è essenziale.
26:29
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Il problema qual è?
26:30
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Se voi avete oligo più lunghi,
26:34
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
questi potrebbero fare un ponte,
26:38
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
ad esempio su un altro pattern potenzialmente
26:43
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
vicino.
26:43
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Gli eventi sono molto rari,
26:45
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
per cui tendenzialmente in questo tipo di amplificazioni cronali
26:49
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
non riuscite a avere...
26:52
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
diciamo gli eventi più grossi,
26:54
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
semplicemente perché non c 'è la possibilità di fare un ponte da un 'altra parte e
26:58
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
i frammenti massimi sono 500.
26:59
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Quando si usavano i sistemi non a
27:10
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
pattern, che cosa succedeva?
27:12
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Il numero di cicli compressivi è sempre lo stesso.
27:16
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Però, che cosa succede?
27:18
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
La superficie,
27:19
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
se voi aumentate la lunghezza del frammento che deve fare
27:23
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
il bridge,
27:25
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
la superficie si allargherà,
27:27
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
ma la quantità di sequenze è sempre la stessa,
27:31
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
quindi vi ritrovereste ad avere la stessa intensità ma distribuita
27:35
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
sulla superficie più ampia.
27:37
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Quindi vuol dire che l 'intensità si abbassa.
27:39
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Il risultato è che,
27:41
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
oltre al fatto che è più facile avere cluster che si sovrappongono,
27:45
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
quello che succede è che l 'intensità è più bassa,
27:47
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
viene lenta come rumore e ovviamente è vero.
27:50
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Per cui il limite fisico dei 500 microditi è
27:54
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
collegato alla quantità di sequenze che voi avete in
27:58
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
uno spazio sufficientemente piccolo da avere un segnale aggregato
28:02
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
che può essere visualizzato e che è la condizione
28:07
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
che è stata ottimizzata nelle cellule a patte.
28:14
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Quindi qua siamo arrivati nello step dopo.
28:17
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Abbiamo costruito tante copie dello stesso tipo all 'interno
28:21
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
di ogni bozzetto e quindi che cosa facciamo?
28:24
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Andiamo a fare un sequenziamento dove attacchiamo
28:30
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
dall 'altra parte il prior control.
28:33
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
e il brano del corpo a questo punto è il punto di attacco per la valenza.
28:37
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Quello che viene fornito a questo punto è la polimerasi e tutti
28:41
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
i quattro le polimerasi.
28:42
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
I noclitidi sono marcati sul tre primo con un clorofolo
28:47
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
di colore diverso.
28:48
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Che cosa succederà?
28:50
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Voi riuscite a fare...
28:56
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Quindi quello che voi riuscite a fare,
28:58
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
il 5' del vostro nucleo di delivero,
29:03
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
si legherà al 3' del primer,
29:06
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
perché il 3' del primer è disponibile.
29:09
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Una volta legato,
29:11
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
la reazione non va più avanti perché il vostro 3' è bloccato
29:16
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
al suo corpo.
29:16
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Quindi questa è la reazione che funziona una singola base
29:20
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
alla volta.
29:21
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Se vedete l 'esempio,
29:24
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
se non entro alla base giusta,
29:26
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
non succede niente.
29:27
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Se entro alla base giusta,
29:29
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
questa è la condizione in cui voi bloccate il
29:33
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
sistema.
29:34
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Quindi,
29:35
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
alla fine di questo primo ciclo di,
29:38
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
diciamo,
29:39
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
addizione del prototide,
29:40
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
come si fa?
29:41
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Si lava via tutto quello che non si è legato e a questo punto c 'è
29:45
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
uno scanner con una luce che permetta
29:50
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
la visione della fluorescenza del vostro segnale,
29:53
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
poi avete questo scanner attraversa tutta la Frosel e rivela
29:57
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
i vari colori per ogni atto.
30:00
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Quindi qua è il gioco,
30:02
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
motivo per cui riusciamo a sequenziare anche nelle
30:06
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
macchine moderne,
30:07
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
riuscite a sequenziare in teoria qualcosa come un genoma
30:11
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
ogni 4 -5 ore.
30:13
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Il punto chiave è il fatto che voi state sequenziando tantissime sequenze
30:17
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
contemporaneamente.
30:18
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Quindi siete andati al di là della problematica
30:22
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
di Sanger.
30:23
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Sanger sequenzava più lungo,
30:25
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
ma ne sequenziava molto poco,
30:26
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
una quanta sera alla volta.
30:27
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Qui siete nell 'ordine di miliardi di sequenze che vengono fatte contemporaneamente.
30:32
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Quello che succede quindi a ogni ciclo,
30:35
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
voi avete l 'addizione di chiaramente che cosa succede.
30:40
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Una volta rivelato il segnale,
30:42
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
quello che succede è che si fa un passaggio a un reagente chimico che taglia
30:47
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
dal treprimo via il cronforo,
30:49
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
si lavora tutto e avete semplicemente un primer esteso che
30:53
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
rappresenta il punto di partenza per andare avanti.
30:55
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
E con questo sistema voi
31:00
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
alla fine riuscite a leggere un passo alla
31:04
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
volta, tutto quello che sta succedendo nei vostri
31:08
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
miliardi di minuti.
31:11
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Cosa succede quando dovete passare dall 'altra parte?
31:14
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
Ricordatevi,
31:15
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
tagliate,
31:15
S…
Speaker 1 (5965195080011619698)
in questo caso con l 'altro reagente che non è un diolo,
អត្ថបទនេះត្រូវបានបង្កើតដោយ AI (ការទទួលស្គាល់ការនិយាយស្វ័យប្រវត្តិ) & # 160; ។ វាអាចមានកំហុស - ពិនិត្យមើលអូឌីយ៉ូដើមសម្រាប់ការប្រើសំខាន់ & # 160; ។ គោលការណ៍ AI
សេចក្ដីសង្ខេប
ចុច សង្ខេប ដើម្បីបង្កើតសេចក្ដីសង្ខេប AI នៃការបកប្រែនេះ & # 160; ។
កំពុងសង្ខេប...
សំណួរ AI អំពីការបកប្រែនេះ
សំណួរអ្វីមួយអំពីការបកប្រែនេះ - AI នឹងរកឃើញផ្នែកដែលទាក់ទងនិងឆ្លើយតប។